知識分享

2010.09.28

細胞質多聚腺苷酸化同源基因干擾 RNA會抑制在小鼠卵母細胞進行減數分裂

台灣婦產科醫學會九十九年度擴大學術研討會 論文摘要
細胞質多聚腺苷酸化同源基因干擾 RNA會抑制在小鼠卵母細胞進行減數分裂
鄭恩惠1,2, 王淑紅3, 黃俊嘉1, 黃梨香1,4, 陳忠義1, 李茂盛1,4
1李茂盛婦產科診所 2中山醫學大學生化科 3中山醫學大學 生命科學系 4中山醫學大學醫學研究所

目的:已有報導指出CphX(胞質多聚腺苷酸化同源基因)會在胚胎幹細胞、卵母細胞和植入前的胚胎表現。cphX基因剔除的轉殖基因小鼠子代的卵子的數目和雌性仔鼠皆有顯著下降。本研究的目的即是要探討cphX基因在減數分裂進展中小鼠卵母細胞的作用。

材料和方法:本研究犧牲5週齡雌性小鼠B6CBF1以獲得未成熟卵母細胞,小鼠經腹腔注射10國際單位的孕馬血清促性腺激素,四十四小時後,從卵巢解剖老鼠,並且以針頭將卵泡刺破,未成熟卵母細胞經收集和清洗後,置入已經使用緩衝劑預平衡的人類輸卵管培養基培養。卵子在攝氏37度和控制含有百分之五的二氧化碳的空氣培養箱培養,以顯微注射的c-mos和cphX小干擾 RNA。所有的卵母細胞注射後24或48小時觀察卵子型態。根據小鼠卵母細胞處在GV期、第一次減數分裂或第二次減數分裂分別紀錄。利用統計軟體進行各組之間的差異分析,P <0.05定義為顯著。

結果:小鼠卵母細胞的比例達到 24小時後,卵子進入第二次減數分裂期情況如下:cphX組為3.6%(3/ 83);c-mos組為 1.3%(1 /77)。對照組為18.8%(15/ 80);和完全未注射組為52.4%(22/24)。在卵母細胞注射 cphX小干擾 RNA時,卵母細胞的數目達到第二次減數分裂階段的卵子數與對照組比較顯著下降(P <.05)。

結論:這些顯示注射cphX小干擾 RNA顯著抑制小鼠卵母細胞繼續進行在減數分裂。因此,cphX基因可能是小鼠進行減數分裂其中的一項重要的因子。